Myosin 1g as a high-risk biomarker in a pediatric patient with lineage switch from acute lymphoblastic leukemia to myeloid phenotype / Miosina 1g como un marcador de alto riesgo en una paciente pediátrica con cambio de linaje de leucemia linfoblástica aguda a fenotipo mieloide

Abstract Background: Myosin 1g (Myo1g) has recently been identified as a potential diagnostic biomarker in childhood acute lymphocytic leukemia (ALL). Case report: We describe the case of a 1-year-old Mexican female patient. Although initially studied for hepatomegaly, an infectious or genetic etiology was excluded. Liver biopsy showed infiltration by neoplastic B-cell precursors (BCPs), and bone marrow (BM) aspirate showed 14.5% of BCPs. In a joint session of the oncology, hematology, and pathology departments, low-risk (LR) BCP-ALL of hepatic origin with aberrant myeloid markers was diagnosed. Although treatment was initiated, the patient presented early with BM relapse. Modest overexpression of Myo1g was observed from the onset. However, at the end of the steroid window, expression increased significantly and remained elevated during this first relapse to BM. The parents refused hematopoietic stem cell transplantation, but she continued chemotherapy. After a second BM relapse at 5 years of age, the phenotype switched to myeloid. Her parents then opted for palliative care, and the patient died two months later at home. Conclusions: This case shows the potential use of Myo1g in clinical practice as a high-risk indicator. Myo1g monitoring may reveal a high risk and relapse trend, even when typical parameter values are not altered: Myo1g could be used to classify patients from low to high risk from diagnosis, allowing patients to promptly receive the best treatment and potentially modifying prognosis and survival.

Resumen Introducción: Recientemente se ha identificado a miosina 1g (Myo1g) como un potencial biomarcador de diagnóstico en la leucemia linfoblástica aguda (LLA) infantil. Caso clínico: Se describe el caso de una paciente mexicana de 1 año de edad. Aunque inicialmente se estudió por hepatomegalia, se descartó una etiología infecciosa o genética. La biopsia hepática mostró infiltración por precursores de células B neoplásicas (PCB) y un aspirado de médula ósea (MO) mostró 14.5% de PCB. En una sesión conjunta de los departamentos de oncología, hematología y patología, se diagnosticó PCB-LLA de bajo riesgo de origen hepático con marcadores mieloides aberrantes. Aunque se inició tratamiento, la paciente presentó tempranamente recaída de MO. Se observó una modesta sobreexpresión de Myo1g. Sin embargo, al final de la ventana de esteroides, la expresión aumentó considerablemente y permaneció elevada durante esta primera recaída a MO. El trasplante de células madre hematopoyéticas fue rechazado por los padres, pero se continuó con la quimioterapia. Tras una segunda recaída de MO a los 5 años, el fenotipo cambió a mieloide. Sus padres optaron entonces por cuidados paliativos y la paciente falleció dos meses después en su domicilio. Conclusiones: Este caso muestra el potencial uso de Myo1g como indicador de alto riesgo en la práctica clínica. El seguimiento de Myo1g puede revelar una tendencia de alto riesgo y recaídas, incluso cuando los valores de los parámetros rutinarios son aparentemente normales; Myo1g podría utilizarse para clasificar a los pacientes de bajo a alto riesgo desde el diagnóstico, lo que permitiría que los pacientes reciban el mejor tratamiento de manera oportuna, modificando potencialmente el pronóstico y la supervivencia.

Screening for COVID-19 in Children Undergoing Elective Invasive Procedures

Objective To report the frequency of asymptomatic infection with SARS-CoV-2 in pediatric patients undergoing invasive medical procedures in a tertiary pediatric hospital. Methods From June to October 2020, a SARS-CoV-2 real-time reverse-transcription polymerase chain reaction (rRT-PCR) test was performed for all pediatric patients scheduled to undergo an elective invasive procedure. None of the patients was symptomatic. The cycle threshold (Ct) values of the ORF1ab gene were recorded for all patients. Results A total of 700 patients were screened for SARS-CoV-2 infection. The median age was 5.7 y old. In total, 46.6% (n=326) of the patients were male, and 53.4% (n=374) were female. The most common underlying diseases were hematooncological (25.3%), gastrointestinal (24.9%), and genitourinary (10.3%). The main scheduled surgical–medical procedures were surgical treatment for acquired congenital diseases, biopsy sampling, local therapy administration, organ transplantation, and the placement of central venous catheters, among others. The SARS-CoV-2 rRT-PCR test was positive in 9.4% (66), and the median Ct value was 35.8. None of the patients developed COVID-19. Conclusions The frequency of asymptomatic SARS-CoV-2 infection was detected in less than 10% of pediatric patients scheduled to undergo an elective invasive procedure in a tertiary hospital. This frequency is higher than those in reports from diferent countries.

Analytical recommendations for SARS-CoV-2 identification by RT-PCR in pediatric patients / Recomendaciones analíticas para la identificación de SARS-CoV-2 por RT-PCR en pacientes pediátricos

Abstract Coronavirus disease 2019 (COVID-19) is caused by the severe acute respiratory syndrome 2 coronavirus (SARS-CoV-2) and is currently listed as a global public health emergency. Timely identification and protocol implementations for molecular detection of this virus are vital for medical decision-making. Identification of SARS-CoV-2 infection cases is based on detection of the virus RNA by molecular tests, particularly real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Technical and operational details specific to each center must be considered to perform the molecular diagnosis of SARS-CoV-2 in pediatric patients. The term “qualified laboratories” involves laboratories in which all users, analysts, and anyone reporting results are trained to develop and interpret results through a procedure implemented previously by an instructor. Such knowledge is essential in detecting and identifying errors during each of its phases: pre-analytical, analytical, and post-analytical, which allow the establishment of continuous improvement policies to ensure the quality of the results, but above all, the physical integrity of health workers.

Resumen La enfermedad por coronavirus de 2019 (COVID-19), causada por el coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave 2 (SARS-CoV-2), está catalogada actualmente como una emergencia de salud pública mundial. La oportuna identificación y la implementación de protocolos para la detección molecular de este virus son de vital importancia para la toma de decisiones médicas. La identificación de los casos de infección por SARS-CoV-2 se basa en la detección de ARN del virus mediante pruebas moleculares, específicamente la reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa (RT-PCR) en tiempo real. Existen detalles particulares de cada centro, tanto técnicos como operacionales, que deben considerarse para llevar a cabo el diagnóstico molecular de SARS-CoV-2 en pacientes pediátricos. El término «laboratorios calificados¼ se refiere a laboratorios en los cuales todos los usuarios, los analistas y cualquier persona que reporta resultados están capacitados para el desarrollo y la interpretación de estos a través de un procedimiento previo implementado por un instructor. Dichos conocimientos son indispensables para la detección y la identificación de errores durante el proceso en cada una de sus fases: preanalítica, analítica y posanalítica. Además, permiten establecer políticas de mejora continua que aseguran la calidad de los resultados, pero sobre todo la integridad física de los trabajadores de la salud.

Respiratory viral infections in pediatric patients with hematopoietic stem cell transplantation / Infecciones respiratorias virales en pacientes pediátricos con trasplante de células progenitoras hematopoyéticas

Abstract Background: Viral respiratory infections in pediatric patients with hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) significantly impact morbidity and mortality. It is necessary to determine the viral agents and their frequency of presentation to understand their impact on transplantation patients’ evolution. Methods: From January 2017 to December 2019, we conducted a cross-sectional, descriptive, and observational study of patients who underwent HSCT with a viral respiratory infection. Viral identification was performed using multiplex polymerase chain reaction for nine respiratory viruses. Descriptive statistics were performed with a report of central tendency measures and percentages. Results: Of the 54 pediatric patients who underwent HSCT, 59.2% presented an airway infection; in turn, at least one viral agent was identified in 59.3% of these patients. The most frequent viral agents were influenza (25.9%), human rhinovirus (18.5%), and respiratory syncytial virus (18.5%). Viral co-infections occurred in 36.8% of the cases. The reported complications were supplemental oxygen requirement (73.6%), support with mechanical ventilation (21%), admission to the pediatric intensive care unit (15.7%), and mortality associated with a viral respiratory infection (10.5%). Conclusions: Viral respiratory infections are frequent in pediatric patients with HSCT; influenza A/B virus was the most frequent agent. As morbidity and mortality increase due to these infections in patients with HSCT, strategies are necessary for its prevention and timely treatment after transplantation.

Resumen Introducción: Las infecciones respiratorias virales en los pacientes pediátricos con trasplante de células progenitoras hematopoyéticas (TCPH) impactan significativamente la morbilidad y la mortalidad. Para comprender su impacto en la evolución de los pacientes receptores de trasplantes es necesario conocer la frecuencia de presentación y los agentes virales. Métodos: De enero de 2017 a diciembre de 2019 se llevó a cabo un estudio transversal, descriptivo y observacional de los pacientes sometidos a TCPH que tuvieron una infección viral de vías respiratorias. La identificación de los virus se realizó por medio de la prueba de reacción en cadena de la polimerasa multiplex para nueve virus respiratorios. Se realizó estadística descriptiva con reporte de medidas de tendencia central y porcentajes. Resultados: De los 54 pacientes incluidos, el 59.2% presentaron una infección de vías respiratorias y se identificó al menos un agente viral en el 59.3% de estos casos. Los virus más frecuentes fueron influenza (25.9%), rinovirus humano (18.5%) y virus sincitial respiratorio (18.5%). En el 36.8% de los casos se detectaron coinfecciones virales. Se presentaron las siguientes complicaciones: requerimiento de oxígeno suplementario (73.6%), soporte con ventilación mecánica (21%), ingreso a la unidad de cuidados intensivos pediátricos (15.7%) y muerte asociada a infección por virus respiratorios (10.5%). Conclusiones: Las infecciones respiratorias virales en los pacientes pediátricos con TCPH son frecuentes; el virus influenza A/B es el agente más habitual. Debido a que estas infecciones se asocian con mayor morbimortalidad en los pacientes con TCPH, son estrategias necesarias para su prevención y tratamiento oportuno posterior al trasplante.

Hematopoietic stem cell transplantation in a patient with osteopetrosis and mutation in CLCN7: long-term follow-up / Trasplante de células progenitoras hematopoyéticas en un paciente con osteopetrosis y mutación en CLCN7: seguimiento a largo plazo

Abstract Background: Osteopetrosis is a rare hereditary bone dysplasia characterized by insufficient osteoclast activity that results in increased bone mineral density. Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) can reverse skeletal abnormalities and restore hematopoiesis. Case report: We present the case of a 3-year and 2-month-old male patient with the diagnosis of osteopetrosis. The patient underwent allogeneic HSCT (Allo-HSCT) using 100% compatible bone marrow from a related donor and received a myeloablative conditioning regimen and a CD34 cell dose (4.7 × 107/kg). In the early post-transplant, frequent complications such as pneumonitis, hypercalcemia, and hyperphosphatemia ocurred. With a suitable granulocytic graft and chimerism of 100%, it was considered a successful transplant. However, the patient showed a delayed platelet graft treated with a platelet-stimulating factor for 6 months. The patient is currently disease-free, outpatient follow-up, with no data on graft-versus-host disease, and no progressive neurological damage. Conclusions: Osteopetrosis is a childhood disease that requires clinical suspicion and early diagnosis. HSCT is necessary at an early age to prevent disease progression and sensorineural, hematological, and endocrinological functions damage that can lead to death.

Resumen Introducción: La osteopetrosis es una displasia ósea hereditaria poco común, caracterizada por una actividad osteoclástica deficiente que aumenta la densidad mineral ósea. Se considera que el trasplante de células progenitoras hematopoyéticas (TCPH) puede revertir las anormalidades esqueléticas y restaurar la hematopoyesis. Caso clínico: Se presenta el caso de un paciente de sexo masculino, de 3 años y 2 meses de edad, con diagnóstico tardío de osteopetrosis. Se realizó un TCPH alogénico de donador relacionado 100% compatible con médula ósea. Se utilizaron un régimen de acondicionamiento mieloablativo y una dosis celular de CD34 de 4.7 × 107/kg de peso. En el postrasplante temprano, el paciente desarrolló complicaciones como neumonitis, hipercalcemia e hiperfosfatemia. Con un injerto granulocítico adecuado y quimerismo del 100% se consideró un trasplante exitoso. Sin embargo, el paciente presentó retraso en el injerto plaquetario, por lo que se administró factor estimulante de plaquetas por 6 meses. Actualmente el paciente se encuentra libre de enfermedad, en seguimiento ambulatorio, sin datos de enfermedad del injerto contra el hospedero y con pruebas de neurodesarrollo sin deterioro neurológico progresivo. Conclusiones: La osteopetrosis es una enfermedad infantil que requiere una sospecha clínica y un diagnóstico temprano, ya que es necesario un TCPH a corta edad como tratamiento para evitar la progresión de la enfermedad y el deterioro de las funciones neurosensoriales, hematológicas y endocrinológicas que puede derivar en la defunción del paciente.

SARS-CoV-2 impact on oral health: a general view / Impacto del SARS-CoV-2 en la salud oral: una visión general

Abstract Coronavirus disease 2019 (COVID-19) is a new disease caused by the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) virus. China reported the first case of COVID-19 in December 2019, and a few months later, the World Health Organization declared it as a pandemic. Oral ulcers in adult patients have been associated with COVID-19. However, no cases have yet been documented in children. The angiotensin-converting enzyme-2 (ACE2) receptor has been identified in tissues of the oral cavity. Studies have identified the tongue as the site with the highest expression of ACE2, and the oral epithelium, gingival epithelium, and salivary glands as sites of lesser extent expression. ACE2 expression is lower in children and varies with age. SARS-CoV-2 in saliva has been identified in various studies, which suggests that this could be a useful sample for diagnosis. However, its presence in saliva would indicate the high risk of contagion of this fluid.

Resumen La COVID-19 es una nueva enfermedad causada por el SARS-CoV-2 (coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo grave). El primer caso de COVID-19 se reportó en China en diciembre de 2019, y unos meses después la Organización Mundial de la Salud la declaró como una pandemia. En pacientes adultos se han asociado úlceras orales a la COVID-19; en niños aún no se han documentado casos. El receptor de la enzima convertidora de la angiotensina 2 (ECA2) se ha identificado en tejidos de la cavidad oral. Los estudios han identificado que la lengua es el sitio con mayor expresión del receptor de la ECA2, y el epitelio bucal, el epitelio gingival y las glándulas salivales lo son en menor medida. La expresión de la ECA2 es menor en los niños y va aumentando con la edad. En diversos estudios se ha identificado el SARS-CoV-2 en la saliva, lo que sugiere que podría ser una muestra útil para el diagnóstico de este virus. Sin embargo, su presencia en saliva indicaría un alto riesgo de contagio de este fluido.

Acute myeloid leukemia associated with t(16:21)(p11;q22) in a pediatric patient / Leucemia mieloide aguda asociada con t(16:21)(p11;q22) en un paciente pediátrico

Abstract Background: Rare subgroups of pediatric patients with acute myeloid leukemia (AML), such as t(16:21) (p11;q22), require international cooperation to establish a proper stratification system to assign clinical risk. Case report: Here, we report a 13-year-old female who was admitted for asthenia, fatigue, and intermittent fever. The hematological data showed thrombocytopenia and anemia, and the bone marrow test showed 82.5% blast cells, which were positive for CD13, CD33, CD38, and CD117. Blast cells showed negative myeloperoxidase staining and positive periodic acid-Schiff staining. A diagnosis of AML M6 was made. Cells were positive for the fusion transcript FUS-ERG t(16;21)(p11;q22). The patient achieved morphological remission. However, molecular remission was not achieved, and she died 11 months after diagnosis. Conclusions: It is essential to report this sporadic case of AML to provide clinicians with data for clinical decision-making, such as for risk-group stratification. To the best of our knowledge, this is the first association between this translocation and this morphological subtype.

Resumen Introducción: La leucemia mieloide aguda (LMA) infantil es una enfermedad heterogénea, por lo que existen subgrupos de rara presentación, como aquellos con t(16;21)(p11;q22). Para establecer el riesgo clínico y la estratificación pronóstica adecuada es necesaria la cooperación internacional. Caso clínico: Se reporta el caso de una adolescente de 13 años, admitida por astenia, adinamia y fiebre intermitente. Los datos hematológicos mostraron trombocitopenia y anemia, con un 82.5% de blastos en médula ósea, los cuales fueron positivos para CD13, CD33, CD38 y CD 117. Los blastos fueron negativos para mieloperoxidasa y positivos para ácido peryódico de Schiff. Se realizó el diagnóstico morfológico de LMA M6. Las células fueron positivas para el transcrito FUS-ERG t(16;21)(p11;q22). La paciente alcanzó la remisión morfológica; sin embargo, no fue posible la remisión molecular y falleció 11 meses después del diagnóstico. Conclusiones: Es importante reportar casos en los que se identifique un subtipo muy raro de LMA infantil para incrementar la evidencia clínica y contribuir con elementos que ayuden a tomar decisiones clínicas y lograr la estratificación en grupos de riesgo. Hasta la fecha, este el primer caso reportado en que se asocia el transcrito t(16;21)(p11;q22) con el subtipo morfológico LMA M6.

Clinical risk profile associated with SARS-CoV-2 infection and complications in the emergency area of a pediatric COVID-19 center / Perfil clínico de riesgo asociado a infección y complicaciones por SARS-CoV-2 en el área de urgencias de un centro pediátrico COVID-19

Abstract Background: In February 2020, the disease caused by the novel coronavirus (SARS-CoV-2), was classified as a pandemic. In the pediatric population, coronavirus disease (COVID)-19 has a reported mortality of less than 6% in complicated cases; however, the clinical characteristics and severity are not the same as those presented in the adult population. This study aimed to describe the clinical manifestations of patients younger than 18 years old and their association with the confirmation of the test and outcomes. Methods: We conducted an analytical cross-sectional study of symptoms suggestive for SARS-CoV-2 infection. All subjects with a confirmatory test for SARS-CoV-2 were included. Initial symptoms, history of influenza vaccination, and previous contact were documented, and mortality and the requirement for assisted mechanical ventilation were identified. The proportions of the variables were compared with the χ2 test. The odds ratio for a positive test and the requirement of intubation was calculated. Results: Of a total of 510 subjects, 76 (15%) were positive for SARS-CoV-2. The associated symptoms were chest pain, sudden onset of symptoms, and general malaise. The variable most associated with contagion was the exposure to a relative with a confirmed diagnosis of COVID-19. Infants and subjects without the influenza vaccine showed an increased risk for respiratory complications. Conclusions: The frequency of positivity in the test was 15% (infants and adolescents represented 64% of the confirmed cases), and the associated factors identified were contact with a confirmed case, sudden onset of symptoms, and chest pain.

Resumen Introducción: En 2019 se reportaron los primeros casos de SARS-CoV-2 (coronavirus tipo 2 del síndrome respiratorio agudo grave), causante de la COVID-19, que alcanzó el grado de pandemia en febrero de 2020. La presentación en la etapa pediátrica reporta una mortalidad menor del 6% en los casos complicados; sin embargo, las características clínicas y su gravedad no son iguales que en la población adulta. El objetivo de este estudio fue describir las manifestaciones clínicas de los pacientes menores de 18 años y su asociación con la confirmación de la prueba, la intubación endotraqueal y la muerte. Métodos: Estudio transversal analítico por cuadro sugestivo de infección por SARS-CoV-2. Se incluyeron sujetos positivos para SARS-CoV-2. Se documentaron los síntomas iniciales, los antecedentes de vacunación contra la influenza y los contactos previos, y se identificaron los desenlaces de mortalidad y requerimiento de ventilación mecánica asistida. Se compararon las proporciones de las variables con la prueba χ2 y se calculó la razón de momios para la presencia de una prueba positiva y requerir intubación. Resultados: De un total de 510 sujetos, 76 (15%) fueron positivos para SARS-CoV-2. Los síntomas asociados fueron dolor precordial, inicio súbito y malestar general. La variable asociada con mayor frecuencia el contagio fue la exposición a un familiar con COVID-19 confirmada. Los sujetos sin vacuna de la influenza presentaron un riesgo mayor de complicaciones respiratorias. Conclusiones: La frecuencia de positividad en la prueba fue del 15%. Se identificaron como factores asociados a prueba positiva el contacto con un caso confirmado de COVID-19, el inicio súbito de los síntomas y el dolor precordial.

Saliva as a promising biofluid for SARS-CoV-2 detection during the early stages of infection / La saliva como biofluido promisorio para la detección del SARS-CoV-2 durante las primeras etapas de la infección

Abstract Background: Diagnostic testing for coronavirus disease (COVID)-19 is performed using nasopharyngeal swabs. This type of sampling is uncomfortable for the patient, dangerous for health workers, and its high demand has led to a global shortage of swabs. One of the alternative specimens is saliva. However, the optimal conditions for the test have not been established. Methods: Reverse transcription-polymerase chain reaction was used to detect the viral genome in saliva samples kept at room temperature, in the fridge or frozen for 2 days. In addition, the influence of brushing teeth and feeding on the detection of the virus in saliva was addressed. Finally, the efficiency of saliva in revealing the presence of the virus during the hospitalization period was determined in children. Results: The viral genome was consistently detected regardless of the storage conditions of saliva samples. Brushing teeth and feeding did not influence the sensitivity of the test. In hospitalized children, positive results were obtained only during the early days. Conclusions: These results support the idea of the use of saliva as an alternative specimen for diagnostic testing for COVID-19. The viral genome is stable and endures perturbations in the oral cavity. However, clearance of the virus from the mouth during the infection may limit the use of the test only to the early stages of the disease.

Resumen Introducción: El diagnóstico de COVID-19 (enfermedad por coronavirus 2019) se realiza con un hisopado nasofaríngeo. El procedimiento de toma de muestra es molesto para el paciente y peligroso para el personal de salud, y la alta demanda de análisis ha conducido a la escasez de hisopos. Una alternativa es el uso de saliva, pero las condiciones óptimas para realizar el estudio no han sido establecidas. Métodos: Se usó la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa reversa para detectar el genoma viral en muestras de saliva mantenidas a temperatura ambiente, en refrigeración o congeladas. Además, se evaluó la influencia del aseo bucal y de la ingesta de alimento en la detección del virus. Finalmente, se determinó el desempeño de la saliva para reportar la presencia del virus durante el periodo de hospitalización en niños. Resultados: El genoma viral fue estable durante 2 días a las diferentes temperaturas ensayadas. El aseo bucal y la ingesta de alimento no influyeron en la detección del virus. En los niños hospitalizados solo se obtuvieron resultados positivos durante los primeros días. Conclusiones: Los resultados coinciden con la idea del uso de la saliva como biofluido alternativo para el diagnóstico de COVID-19. El genoma viral es estable y no se ve afectado por perturbaciones en la cavidad oral; sin embargo, la dinámica de la infección puede provocar que el ensayo solo sea útil durante las primeras etapas de la enfermedad.

Reconstitución de células natural killer después del trasplante de células progenitoras hematopoyéticas en niños / Natural killer cell reconstitution after hematopoietic stem-cell transplantation in children

Resumen Introducción: Después de un trasplante de células progenitoras hematopoyéticas (TCPH), la reconstitución de las células natural killer (NK) es la principal barrera contra las infecciones virales. Objetivo: Determinar que el conocimiento sobre la cinética de la reconstitución de las células NK posterior al TCPH contribuye a un eficiente monitoreo del trasplante, lo que incrementa la posibilidad de éxito de este. Método: Se incluyeron 21 pacientes sometidos a TCPH, así como un grupo control de individuos clínicamente sanos. En diferentes momentos después del trasplante (intervalo de 21 a 670 días), mediante citometría de flujo se cuantificaron las células NK CD3− CD16+ CD56+ en muestras de sangre periférica. Resultados: La recuperación de las células NK ocurre entre los tres y seis meses y entre los 10 y 12 meses postrasplante; su número fue significativamente menor (en comparación con el grupo control) en el tiempo restante del monitoreo. Conclusiones: El primer periodo de recuperación de las células NK ocurre entre los tres y seis meses posteriores al trasplante. La reconstitución es transitoria y el número de células NK varía en los primeros años.

Abstract Introduction: After hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), natural killer (NK) cells reconstitution is the main barrier against viral infections. Objective: To determine that the knowledge on the kinetics of NK cell reconstitution after HSCT contributes to transplant efficient monitoring, which increases the possibility of its success. Method: Twenty-one patients undergoing HSCT were included, as well as a control group of clinically healthy individuals. At different time points after transplantation (range of 21 to 670 days), CD3- CD16+ CD56+ NK cells were quantified by flow cytometry in peripheral blood samples. Results: NK cell recovery occurs at three to six months and 10 to 12 months post-transplantation; their number was significantly lower (in comparison with the control group) in the rest of the monitoring time. Conclusions: The first period of NK cell recovery occurs between three and six months after transplantation. Reconstitution is transient and the number of NK cells varies in the first years.

Manifestaciones orales de trastornos hematológicos no neoplásicos / Oral manifestations of non-neoplastic hematologic disorders

Las alteraciones hematológicas pueden tener el primer signo en la cavidad oral y los signos varían dependiendo de la línea celular que se encuentre afectada: eritrocitos, leucocitos y plaquetas. La formación de las células sanguíneas se lleva a cabo en la médula ósea a través de un proceso denominado hematopoyesis que se encarga de la formación, desarrollo y especialización de todas sus células sanguíneas funcionales, pasan de células troncales pluripotenciales a células hematopoyéticas maduras que emergen a la sangre periférica. El odontólogo debe ser capaz de identificar los distintos signos en la cavidad oral que podrían sugerir que el paciente padece un trastorno hematológico, el cual podría complicar el tratamiento dental. La identificación oportuna de estos signos a través de una minuciosa exploración física y la historia clínica completa evita que se presenten complicaciones en el paciente y que éstas puedan poner en riesgo su vida, por lo que al encontrar algún signo sugerente de un trastorno hematológico debe referirse al paciente con el hematólogo (AU)

Hematological alterations may be the first sign in the oral cavity and symptoms vary depending on the cell line that is affected: Erythrocytes, leukocytes and platelets. The formation of blood cells are held in the bone marrow through a process called hematopoiesis, which is responsible for training, development and specialization in all its functional blood cells, they move from pluripotent stem cell to hematopoietic cells mature emerging to peripheral blood. The dentist must be able to identify the different signs in the oral cavity that could suggest that the patient has a haematological disorder, which could complicate dental treatment. The timely identification of these signs through a thorough physical examination and the complete clinical history prevents complications from occurring in the patient and may put their lives at risk, so when finding any sign suggestive of a hematological disorder should refer to the patient with the hematologist (AU)

Determinación y cuantificación de subpoblaciones de linfocitos T y células natural killer en sangre periférica de individuos sanos por citometría de flujo / Detection and quantification of T-cell subpopulations and NK cells in peripheral blood from healthy individuals

Resumen Introducción: La determinación de las diferentes subpoblaciones de los linfocitos T en las diversas patologías y el monitoreo postratamiento ayuda a que el médico tome decisiones terapéuticas teniendo como referencia la cinética de los linfocitos T localizados en sangre periférica. Métodos: Se realizó la estandarización de un perfil de moléculas de superficie para la caracterización de subpoblaciones de linfocitos T: naïve, activados y de memoria, así como las células natural killer o asesinas naturales (CD3− CD56+) en sangre periférica de individuos clínicamente sanos. Resultados: Se identificaron las subpoblaciones de linfocitos: naïve (CD3+, CD4+ o CD8+, CD45RA+, CD62L+, CCR7+), activados (CD3+, CD4+ o CD8+, CD45RA+ o CD45RO+, CD69+ y/o CRTAM+), efectores (CD3+, CD4+ o CD8+, CD45RA+, CD62L−, CCR7−), de memoria central (CD3+, CD4+ o CD8+, CD45RO+, CD62L+, CCR7+) y de memoria efectora (CD3+, CD4+ o CD8+, CD45RO+, CD62L−, CCR7−) en las poblaciones de linfocitos T CD4+ y CD8+. Se integraron los datos obtenidos con estadística descriptiva (valores mínimos, valores máximos, media, mediana). Conclusiones: Este panel será de gran utilidad para monitorear pacientes en quienes se requiera valorar el estado inmunológico desde el punto de vista celular. Particularmente, puede apoyar en el seguimiento de los pacientes en los que se requiera evaluar la reconstitución inmunológica (componente celular de estirpe T).

Abstract Background: The knowledge of the participation of different subpopulations of T lymphocytes in various pathologies helps to make therapeutic decisions, having as reference the presence of the different subpopulations of the T lymphocytes associated with the disease. Methods: A profile standardization of surface molecules for the characterization of subpopulations of T cells was conducted: naïve, activated and memory, as well as natural killer (CD3− CD56+) cells in peripheral blood of clinically healthy individuals. Results: Naïve (CD3+, CD4+ or CD8+, CD45RA+, CD62L+, CCR7+), activated (CD3+, CD4+ or CD8+, CD45RA+ or CD45RO+, CD69+ and/or CRTAM+), effectors (CD3+, CD4+ o CD8+, CD45RA+, CD62L−, CCR7−), central memory (CD3+, CD4+ o CD8+, CD45RO+, CD62L+, CCR7+), memory effectors (CD3+, CD4+ or CD8+, CD62RO+, CD62L−, CCR7−) subpopulations were analyzed by flow cytometry. Descriptive statistics parameters were calculated (minimum values, maximum values, mean values, median). Conclusions: This panel can be very useful for monitoring patients in whom the immunological status from a cellular perspective is needed. Particularly, it can support the follow-up of patients who require an immunological reconstitution (T-cell component) evaluation.

Vigilancia epidemiológica para la identificación de casos de infección respiratoria aguda por enterovirus D68 en niños en un hospital de tercer nivel de atención durante 2014-2016 / Surveillance for the identification of cases of acute respiratory infection by enterovirus D68 in children in a tertiary level care hospital during 2014-2016

Resumen Introducción: La reemergencia de las infecciones por Enterovirus D68 (EV-D68) se reportó en los EE.UU. desde agosto-octubre de 2014 (691 casos). En México, un brote se reportó en el Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias (24 casos). Se presentan los resultados de la vigilancia epidemiológica en un hospital pediátrico nacional de tercer nivel para Enterovirus sp. (EV) y otros virus respiratorios. Método: Tras la alerta emitida por la reemergencia del EV-D68 en 2014, la vigilancia epidemiológica -que solo detectaba virus respiratorios mediante PCR en pacientes con enfermedad tipo influenza mediante toma de hisopados nasofaríngeos- se expandió para incluir niños con exacerbación de asma o dificultad respiratoria aguda. Las muestras positivas para EV fueron confirmadas y tipificadas por secuenciación. Posteriormente, se utilizó secuenciación de siguiente generación para obtener el genoma viral completo. Resultados: De 1705 muestras, 13 fueron positivas para EV. Los pacientes con EV presentaron la siguiente comorbilidad: enfermedad pulmonar crónica (7.7%), enfermedad neoplásica (15.4%), asma/rinitis alérgica (23%), neumonías de repetición (23%), y otras (23%). De las 13 muestras positivas para EV, tres resultaron positivas para EV-D68. Dichos casos requirieron ventilación mecánica invasiva, no tuvieron afectación neurológica y sobrevivieron. Conclusiones: La afectación por EV-D68 de la población estudiada fue menor que lo reportado en México durante el mismo periodo. Los casos de infección por EV-D68 presentan diversa comorbilidad, aunque escasas enfermedades pulmonares, lo cual pudiera explicar la baja tasa de ataque. La presencia del sistema de vigilancia epidemiológica establecido y la prevención de infecciones pudieron haber contenido el brote.

Abstract Background: The reemergence of enterovirus D68 (EV-D68) infections in the United States was reported from August-October 2014 (691 cases). In Mexico, an outbreak at the National Institute of Respiratory Diseases was reported (24 cases). The results of epidemiological surveillance of Enterovirus sp. (EV) and other respiratory viruses in a national pediatric tertiary care level hospital are presented. Methods: Following the alert issued by the reemergence of EV-D68 in 2014, epidemiological surveillance -which only detected respiratory viruses by PCR in patients with influenza-like illness using nasopharyngeal swabs- expanded to include children with asthma exacerbation or acute respiratory distress. Positive samples to EV were confirmed and typed by sequencing. Subsequent sequencing was used to obtain the complete viral genome. Results: Of 1705 samples, 13 were positive to EV. Patients with EV presented the following comorbidities: chronic lung disease (7.7%), neoplastic disease (15.4%), allergic asthma/rhinitis (23%), recurrent pneumonia (23%), and other (23%). Of the 13 samples positive for EV, three were positive for EV-D68. These cases required invasive mechanical ventilation, presented no neurological involvement and survived. Conclusions: The impact of the population studied by EV-D68 was lower than that reported in Mexico during the same period. Cases of EV-D68 infection had multiple comorbidities, but few pulmonary comorbidities, which could explain the low attack rate. The epidemiological surveillance and infection prevention system may have contained the outbreak.

Correlation between viral load of cytomegalovirus and tacrolimus and sirolimus levels in transplanted pediatric patients / Correlación entre la carga viral de citomegalovirus y los niveles de tacrolimus y sirolimus en pacientes pediátricos trasplantados

Abstract: Introduction: Survival of transplant patients and grafts depends largely on the use of immunosuppressive drugs. However, a balance remains to be established among immunosuppression, transplant rejection and cytomegalovirus (CMV) infection, which results in a high rate of morbidity and mortality. The aim of this study was to define a better strategy for monitoring transplanted patients based on the analysis of the blood concentration of sirolimus and tacrolimus and the burden of CMV. Methods: Fifty five post-transplant (kidney and liver) pediatric patients, nine treated with sirolimus and 46 treated with tacrolimus, were included. A total of 541 measurements were obtained. In each measurement the concentration of immunosuppressant in whole blood and CMV viral load in plasma and whole blood was quantified by real-time PCR. Pearson correlation coefficient (r) was estimated. Results: Values of r ≤ 0.0747 were found for the relationship between dose and concentration of immunosuppressant; r = 0.9406 for the relationship between viral load in whole blood and plasma, and r ≤ 0.4616 for the relationship between concentration of immunosuppressant and viral load. Conclusions: These data support that the doses of immunosuppressive drugs do not correlate with the levels of the same in whole blood. Therefore, systemic levels of immunosuppressant should be constantly monitored together with CMV load. Meanwhile, a high correlation between viral load measured in whole blood and plasma was found.

Resumen: Introducción: La supervivencia de pacientes trasplantados y de los injertos depende en gran medida del uso de fármacos inmunosupresores. Sin embargo, aún no se ha logrado establecer un balance entre la inmunosupresión, el rechazo al trasplante y la infección por citomegalovirus (CMV), lo cual deriva en una alta tasa de morbilidad y mortalidad. El objetivo de este trabajo fue definir una mejor estrategia de seguimiento de los pacientes trasplantados a partir del análisis de la concentración en sangre de sirolimus y tacrolimus y la carga de CMV. Métodos: Se incluyeron 55 pacientes pediátricos post-trasplante (riñón e hígado), nueve en tratamiento con sirolimus y 46 en tratamiento con tacrolimus. Se obtuvieron 541 mediciones en total. En cada medición se cuantificó la concentración de inmunosupresor en sangre total y la carga viral de CMV en plasma y sangre total mediante PCR en tiempo real. Se calculó el coeficiente de correlación de Pearson (r). Resultados: Se encontraron valores de r ≤ 0.0747 para la relación entre dosis y concentración del inmunosupresor; de r = 0.9406 para la relación de la carga viral entre suero y sangre total y de r ≤ 0.4616 para la relación entre concentración de inmunosupresor y carga viral. Conclusiones: Estos datos apoyan que la dosis de los fármacos inmunosupresores no correlaciona con los niveles de los mismos en sangre total. Por ello, deben ser constantemente monitoreados junto con la carga viral. Por su parte, se encontró alta correlación entre la carga viral medida en sangre total y plasma.

Transición parasitaria: experiencia en un hospital pediátrico de tercer nivel (1990-2010) / Parasitological transition: Experience in a third-level pediatric hospital (1990-2010)

ResumenINTRODUCCIÓN: Hace algunos años, el motivo principal para la solicitud del diagnóstico parasitológico era la sospecha de una etiología de base parasitaria. En la actualidad, el motivo de consulta y la solicitud del diagnóstico se encuentran asociados con una comorbilidad hemato-oncológica, autoinmune, inmunodeficiente o una condición postrasplante.MÉTODO: Se analizaron los resultados del laboratorio de parasitología clínica del Hospital Infantil de México Federico Gómez de enero de 1990 a diciembre del 2010, para obtener la frecuencia y distribución de parásitos y comensales por año y década.RESULTADOS: Se analizaron 211,600 muestras del periodo estudiado, con una media anual de 10,100 y desviación estándar de 3,500. El porcentaje de parásitos y comensales fue del 37.73%, y la frecuencia de positividad solo a parásitos fue del 21.4%. La diferencia de proporciones entre décadas resultó significativa, con una p < 0.0001.CONCLUSIONES: La tendencia en el comportamiento de las parasitosis intestinales durante el periodo estudiado mostró un cambio tanto en frecuencia como en género y especie de los agentes reportados. La generación de información de carácter epidemiológico es necesaria para conocer la tendencia de las parasitosis y de sus variaciones a través del tiempo.

AbstractBACKGROUND: In recent years, the main reason for parasitological diagnosis was suspicion of a parasitic etiology. Currently, diagnosis and consultation are associated with co-morbidity with a hemato-oncological, autoimmune, immunodeficiency or post-transplant condition.METHODS: Results collected from the Parasitology Laboratory of the Hospital Infantil de Mexico Federico Gómez from January 1990 to December 2010 were analyzed to determine the frequency and distribution of parasites and commensals per year and decade.RESULTS: There were 211,600 samples analyzed with a statistical media of 10,100 and a standard deviation of 3,500 samples. Percentage of observations for parasitic structures as well as commensals was 37.73% according to Pearson Chi square with a significant difference among percentages between decades (p < 0.0001).CONCLUSIONS: Behavioral tendency of intestinal parasitosis during the last two decades shows a change in frequency and genera from the agents that were reported at this pediatric health care level. The processing of epidemiologic information is important in order to determine the response of the parasitosis and its variations over time.

Cistatina C como prueba de rutinapara evaluar la función renal en pacientes pediátricos / Cystatin C as a routine test to evaluate kidney function in pediatric patients

Numerosos estudios han demostrado que los niveles plasmáticos de cistatina C tienen más exactitud que los de creatinina en la estimación de la tasa de filtración glomerular (eTFG). Sin embargo, no se utiliza como prueba rutinaria en el diagnóstico de patologías renales pediátricas. El objetivo de este estudio fue comparar la TFG para cistatina C en pacientes pediátricos mexicanos con y sin exposición a factores de riesgo para presentar Insuficiencia Renal Aguda (IRA) y corroborar las ventajas de emplear este marcador en el diagnóstico oportuno de patologías renales en relación con la creatinina. Se analizaron 106 muestras para estimar la TFG. Se cuantificó la concentración de creatinina y cistatina C, sustituyendo los valores en las fórmulas MDRD v-4 y Filler y Lepage, respectivamente. Se compararon las concentraciones tanto de creatinina como de cistatina entre los grupos de estudio por medio de U de Mann Whitney. Asimismo, se evaluó la correlación entre estos dos metabolitos divididos por presencia o no de factores de riesgo para presentar la enfermedad renal. Se observó una correlación entre las concentraciones de creatinina y cistatina C sérica, tanto en el grupo de pacientes sin factores de riesgo para IRA (r=0,936, p<0,001) como en los que sí presentaron factores de riesgo para IRA (r=0,952, p<0,001).El grupo con factores de riesgo mostró concentraciones mayores tanto de cistatina como de creatinina, así como de eTFG para ambos metabolitos. La cistatina C muestra una buena correlación con la creatinina. Por otro lado,la cistatina alterada identificó a un mayor número de pacientes con factores de riesgo para IRA, por lo cual se propone su uso como prueba de escrutinio en pacientes pediátricos...

Susceptibilidad antimicrobiana de microorganismos causantes de infección de vías urinarias bajas en un hospital pediátrico / Antimicrobial susceptibility of uropathogens from uncomplicated urinary tract infection in a pediatric hospital

Introducción: La infección del tracto urinario en los niños es reconocida como una causa de morbilidad y de condiciones médicas crónicas, por lo que resulta indispensable conocer con claridad la patogénesis de esta enfermedad. Sin embargo, la resistencia creciente complica su tratamiento ya que aumenta la morbilidad, los costos, la estancia hospitalaria y el uso de fármacos de mayor espectro antimicrobiano. El propósito de este estudio fue determinar la susceptibilidad antimicrobiana de los uropatógenos aislados en niños. Métodos: Se incluyeron en el estudio 457 niños que asistieron a la consulta externa y a urgencias del Hospital Infantil de México Federico Gómez, con síntomas de infección del tracto urinario baja no complicada. La orina fue tomada a la mitad del chorro o por cateterismo, y se realizó la identificación y la susceptibilidad antimicrobiana. Resultados: Los patógenos aislados con mayor frecuencia fueron: Escherichia coli (E. coli) (312, 68.3%), Enterococcus spp. (42, 11%), Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) (40, 8.7%), Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) (34, 7.5%), Proteus mirabilis (P. mirabilis) (21, 4.5%), Enterobacter cloacae (8, 1.7%). La resistencia para trimetoprima/sulfametoxazol fue del 73.7, 62.2, 100, 52, 50%,respectivamente, para E. coli, K. pneumoniae, P. aeruginosa, P. mirabilis y Enterobacter spp., del 92.5% para Enterococcus faecalis (E. faecalis) y del 49.9% para Enterococcus faecium (E. faecium). Para ampicilina fue del 86.3, 45, 100, 47.9 y 66.6% para las mismas bacterias, respectivamente. Para ciprofloxacina del 33.8, 9, 18.8, 0 y 0%; para nitrofurantoína del 4.4, 13, 97.7, 70, 0% para enterobacterias, del 0% para E. faecalis y del 16.7% para E. faecium. Conclusiones: Los antimicrobianos frecuentemente prescritos para el tratamiento empírico de la infección del tracto urinario no complicada demuestran resistencia importante o baja susceptibilidad cuando se les probó frente a las cepas aisladas.

Background: Urinary tract infection in children is well recognized as a cause of acute morbidity and chronic medical conditions. As a result, appropriate use of antimicrobial agents, however, increases antibiotic resistance and complicates its treatment due to increased patient morbidity, costs, rates of hospitalization, and use of broader-spectrum antibiotics. The goal of this study was to determine antibiotic susceptibility to commonly used agents for urinary tract infection against recent urinary isolates. Methods: A total of 457 consecutive children attending the emergency room at the Hospital Infantil de México Federico Gómez with symptoms of uncomplicated lower urinary tract infection were eligible for inclusion. Patients who had had symptoms for ≥ 7 days and those who had had previous episodes of urinary tract infection, received antibiotics or other complicated factors were excluded. Midstream and catheter urine specimens were collected. All isolates were identified and the in vitro activities of antimicrobials were determined. Results: The most frequently isolated urinary pathogens were as follows: Escherichia coli (E. coli) (312, 68.3%), Enterococcus spp. (42, 11%), Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) (40, 8.7%), Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) (34, 7.5%), Proteus mirabilis (P. mirabilis) (21, 4.5%), Enterobacter cloacae (8, 1.7%). The resistance to trimetoprim/sulfametoxazol (%) was 73.7, 62.2, 100, 52, and 50, respectively, for E. coli, K. pneumoniae, P. aeruginosa, P. mirabilis and Enterobacter spp., 92.5 for Enterococcus faecalis (E. faecalis) and 49.9 for Enterococcus faecium (E. faecium). Ampicillin was 86.3, 45, 100, 47.9, and 66.6% for the same strains, ciprofloxacin 33.8, 9, 18.8, 0, 0%, nitrofurantoin 4.4, 13, 97.7, 70, 0%; to E. faecalis 0% and 16.7% to E. faecium. Conclusions: Frequently prescribed empirical agents for uncomplicated urinary tract infection demonstrate lowered in vitro susceptibilities when tested against recent clinical isolates.

Expresión atípica en la detección y cuantificación del virus de Epstein-Barr utilizando PCR en tiempo real / Atypic expression in the detection and quantification of Epstein-Barr virus using real-time PCR

Introducción. La carga viral del virus de Epstein-Barr (VEB) no solamente sirve para detectar una infección activa, sino también como marcador tumoral de ciertas formas malignas. En los pacientes inmunocomprometidos está relacionado con el síndrome linfoproliferativo postrasplante (SLPT) y la incidencia se encuentra en el orden de 1 a 20%. Se recomienda la determinación de la carga viral del VEB en sangre total y plasma para dar seguimiento a los pacientes en riesgo de padecer el SLPT; para esto, se utiliza como herramienta la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR-TR). El objetivo de este trabajo es describir los hallazgos de las variaciones identificadas en el genoma del VEB al realizar la detección y cuantificación en muestras de pacientes pediátricos, utilizando la tecnología de PCR-TR. Métodos. Se analizaron retrospectivamente los resultados de 352 pacientes pediátricos a los que se les había realizado la detección y cuantificación del VEB en sangre periférica y plasma por medio de PCR-TR. Se amplificó un fragmento de 166 pb del genoma, utilizando un diseño de la compañía TIB MOLBIOL y el equipo LightCycler®, con una temperatura específica de desnaturalización (Tm) de 68 °C. Resultados. De los 352 pacientes estudiados, se detectó la presencia del VEB en 132 (37.5%) y se cuantificó la carga viral. En 5 de los pacientes positivos (3.8%), se identificó un cambio de la Tm. Por medio de electroforesis en gel de agarosa, se comprobó que el amplificado obtenido corresponde al fragmento de 166 pb. Conclusiones. Consideramos que puede existir una disminución en la concentración de guanina-citosina (G-C) en la secuencia blanco, ya que la Tm sufrió una disminución en todos los casos reportados. Sin embargo, se requiere la secuenciación de los amplificados para determinar con precisión la causa de disminución en la Tm.

Background. Epstein-Barr virus (EBV) viral load is useful not only for detection of an active infection but also as a tumor marker for certain malignant forms. In immunocompromised patients it is related to postransplant lymphoproliferative syndrome (PTLS) with an incidence on the order of 1 to 20%. It is recommended to determine viral load in whole blood and plasma to monitor patients at risk for developing PTLS. Real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) is a useful tool for this determination. In these determinations the melting curve (Tm) plays an important role because changes in Tm suggest that the target sequence has suffered mutations, although the selected regions for detection and quantification of EBV are highly conserved. We undertook this study to describe the findings of the variations identified in the EBV genome and to perform the detection and quantification in samples of pediatric patients using RT-PCR. Methods. Results from 352 pediatric patients were analyzed retrospectively in whom investigation of the EBV was performed in peripheral blood and plasma by RT-PCR. For detection and quantification of EBV, a 166-bp fragment of the genome was amplified using a design of TIB MOLBIOL and the LightCycler® equipment with a Tm of 68 °C. Results. Of the 352 patients studied, in 132 (37.5%) presence of EBV was detected and quantified the viral load. In five (3.8%) of the positive patients, a change of the Tm was identified Using electrophoresis running in agarose gel, it was proved that the obtained amplification corresponds to the 166-bp fragment. Conclusion. The specific product and size of the amplified remained unchanged; therefore, we there is a high probability of decrease in the concentration of guanine-cytosine in the target sequence because the Tm showed a decrease in all the reported cases. It is required the sequence of the amplification is required to precisely determine the cause of the decrease in the Tm.